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4.4 Rekombinantes des-[225-246]-MtrA (MJMtrA3) aus M. jannaschii 69

4.4.1 Reinigung 69

4.4.2 Charakterisierung 70

4.4.3 Kristallisation 71

4.5 Rekombinantes des-[238-252]-MtrA mit C-terminalem StrepII-

Affinitätspeptid (MKMtrA) aus M. kandleri

4.6 Rekombinantes M. marburgensis MtrH (MMRMtrH) 74

4.7 Co-Expression und gemeinsame Reinigung von des-[225-246]-MtrA

und MtrH (MJMtrA3+MJMtrH) aus M. jannaschii

4.8 Die F

420

-abhängige N

-Methylen-H

MPT-Dehydrogenase (KMtd)

aus M. kandleri

4.8.1 Co-Kristallisation von KMtd mit H

MPT-Derivaten und F

420

4.8.2 Strukturlösung 78

4.8.3 Strukturbeschreibung 80

5 Diskussion

5.1 Der N

-Methyl-H

MPT:Coenzym M-Methyltransferasekomplex aus

M. marburgensis

5.1.1 Isolierung und Reinigung des Mtr-Komplexes 88

5.1.2 Der oligomere Zustand des Mtr-Komplexes 89

5.1.3 Abtrennung der Untereinheit MtrH 90

5.4.1 Strukturbestimmung 91

5.2 Die Untereinheit MtrA des N

-Methyl-H

MPT:CoM-

Methyltransferasekomplexes

5.2.1 Heterologe Expression in E. coli 92

5.2.2 Des-[225-246]-MtrA (MJMtrA3) aus M. jannaschii 93

5.2.3 Des-[238-252]-MtrA (MKMtrA) aus M. kandleri 94

5.3 Die Untereinheit MtrH des N

-Methyl-H

MPT:CoM-

Methyltransferasekomplexes

5.3.1 Heterologe Expression von mtrH 95

5.3.2 Rekombinantes MtrH (MMRMtrH) aus M. marburgensis 96

5.4 Die F

420

-abhängige N

-Methylen-H

MPT-Dehydrogenase (KMtd)

aus M. kandleri

5.4.1 Die Bindung von H

MPT und F

420

an KMtd 97

5.4.2 Die Hydrid-Transferreaktion 99

5.5 Ausblick 101

6 Literatur

103

7 Anhang

113

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