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5 Ergebnisse

423 bp

RTmetIIfw

RTmetIIB

RTmetIIr

acN

sdmA

sdmC

300

700

500

837 bp

RTpac RTmetIrvB

RTmetIIB

1000

700

500

300

sdmC

acN

sdmA

Abb. 19: RT-PCR zum Nachweis eines separaten Transkriptionsstarts des Gens

sdmC

A: Das sdmC-Transkript wurde in der Gesamt-RNA aus dem Stamm V1

∆

sdmB nachgewiesen. Die

Kultivierung der Zellen zur RNA-Präparation erfolgte unter Selenlimitierung. Die reverse Transkription

wurde mit dem Primer RTmetIIB durchgeführt, die Amplifikation mit den Primern RTmetIIfw und

RTmetIIrv. Die Bindestellen der Oligonukleotide sind im oberen Teil der Abb. schematisch dargestellt.

B : Die reverse Transkription wurde mit dem Primer RTmetIIB durchgeführt, die Amplifikation jedoch

mit den Primern RTpac und RTmetIrvB. Die Bindestellen der Oligonukleotide sind schematisch im

oberen Teil der Abb. dargestellt.

Spuren: bp: Größenstandard in Basenpaaren; 1 u. 9: GenRuler

DNA Ladder; 2, 4: 1 µg oder 5 µg

Gesamt-RNA; 3, 5: Kontrollreaktion ohne Addition der reversen Transkriptase; 6: Kontrollreaktion mit

20 ng chromosomaler DNA; 7, 8: Kontrollreaktionen mit 20 ng chromosomaler DNA, aber mit jeweils

einem Amplifikationsprimer.

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